Substrates of luciferase 冷光酶基质

Luciferase与其substrate催化反应后能够产生出可侦测的冷光讯号，是常用与Reporter assays的实验方法之一。最代表的研究应用为基因表达实验，我们能在想侦测的target gene后面加上reporter gene (luciferase DNA sequence)。最后使用Luciferase与substrates反应所产生冷光的讯号，来侦测target gene表达的位置及表达量。我们的substrate除了有最常见的D-Luciferin (particularly firefly luciferin)。同时也有Coelenterazine，可用于侦测细胞内钙离子浓度、超氧离子及其他需要生物冷光的应用。

冷光产生的原理

3 种类型的冷光substrate

1.  Flah Type -Luciferase Assay System （迅速型）

无需反应等待时间，适合即加即测的实验或是冷光讯号较低的样品需增加灵敏度的实验

2.  Bright Type -Luciferase Assay System （呈效型）

在短时间内即可达到放光极大值并维持放光，适合high troughput applications 及需要增加灵敏度的实验

3.  Steady Type -Luciferase Assay System （稳定型）

Steady type 讯号强度较低但可稳定持续长时间放光，适合需要长时间纪录冷光讯号的实验及 high throughput application使用

实验操作